各1滴)。每次检测时至少每5块微滴板中应有一组上述三种对照试验。
B3.3.2.7 往各孔滴完靶菌菌液之后，应将该菌液两滴分别滴加到一个巧克力色琼脂平皿的一端，沿着划好的两条线倾斜下流，于37℃烛缸内同时培养，次日检查每滴靶菌的菌落数及其纯度。
B3.3.2.8 判断结果时，先检查上述三种对照试验的结果：补体的和细菌生长对照的各孔应出现众多的红色点状小菌落；阳性参考血清应达到原来确定的杀菌滴度。若所试各孔中红色点状菌落数目明显地少于补体对照孔或不出现红色点状菌落时，则判断为杀菌阳性；如果所试孔中的菌落数目接近补体对照孔的一半或更多时，则判断为杀菌阴性。
B3.3.2.9 根据红色点状菌落数目的多少，以符号"＋"记录试验结果。若补体及靶菌生长对照各孔的细菌正常生长时，应出现众多红色点状菌落，可记为"＋＋＋＋"。当所试各孔与其比较，菌落数减少30％以下，记为"＋＋＋"；减少50％左右记为"＋＋"；减少70％左右记为"＋"；每孔少于10个菌落则记为"±"。以细菌生长成呈"＋"及以下者判断为杀菌阳性；以"＋＋"及以上者判为杀菌阴性。以出现杀菌阳性的血清最高稀释度为杀菌抗体的最高滴度。
附录C
(提示的附录)
胶乳凝集试验
C1 目的
应用胶乳凝集试验测定病人CSF、急性期血清和尿中Nm群特异抗原，辅助流脑临床诊断。
C2 材料
C2.1 10％胶乳颗粒(Latex Partic1es，Lx)悬液，颗粒直径为0.81μm。
C2.2 从兔免疫血清中提纯的抗A、B和C群Nm的IgG。
C2.3 在洁净玻璃板上，用红漆画两排红圈，其直径为3.5cm左右，漆干后备用。
C2.4 pH8.2，0.1mol/L硼酸盐缓冲液。
C2.5 BSA。
C2.6 白明胶。
C2.7 戊二醛。
C2.8 叠氮钠。
C2.9 怀疑流脑病人的CSF或急性期血清或尿液。
C3 试验方法
C3.1 兔抗不同群Nm的IgG致敏Lx。
C3.1.1 将10％Lx悬液用硼酸缓冲液再稀释80倍。
C3.1.2 取稀释的Lx悬液1个体积分别加等体积合适浓度的兔抗不同群Nm的IgG，置25mL容量的三角瓶中。
C3.1.3 在37℃水浴中旋转(120r/min)振荡瓶中的反应物，致敏Lx2h。必要时可在每毫升Lx中加25％戊二醛10～20μL，这将有助于Lx吸附IgG。
C3.1.4 离心致敏过的Lx(3000r/min，30min)，用1mL吸管小心吸取上清液，计量后弃之；再加含有0.1％BSA的硼酸盐缓冲液(Borate－Buffered Solution Containing BSA，BBSB)，混悬Lx，同上离心，弃上清，除去游离的IgG；照此重复洗涤Lx3次。
C3.1.5 用BBSB液再将Lx恢复到致敏时的浓度，加叠氮钠至终浓度为0.1％，置4℃备用3～6个月。
C3.1.6 用正常兔IgG同上步骤致敏Ix作为阴性对照。
C3.2 以胶乳凝集试验检测疑似流脑病人标本内Nm群特异性抗原。
C3.2.1 病人标本的处理：CSF离心(3000r/min，30min)，取上清，沉淀部分作细菌培养；急性期血液(2mL)，分离血清，置56℃将其灭活30min；急性期尿液5mL加20mL无水乙醇，置4℃1～2h，离心(3000r/min，15min)，弃上清，收集沉淀部分加0.25mL BBSB液将其溶解，同前离心，小心地吸取上清液待测，不要吸取尿中不溶解的沉渣。
C3.2.2 用BBSB液将处理过的标本从1：2起连续倍比稀释成不同的稀释度。
C3.2.3 用9号针头分别吸取各稀释度标本2滴滴到玻璃板上的红圈内，其中1滴滴到上列一排的红圈内，作为试验组；另1滴滴到下列一排的红圈内，作为平行对照组。
C3.2.4 往试验组的红圈内各加1滴免疫的兔IgG致敏过的Lx悬液；往对照组的红圈内各加1滴正常兔IgG所致敏的Lx悬液。
C3.2.5 轻轻地旋摇玻板，使标本与Lx充分混匀。
C3.2.6 在1～2min内即可见凝集，5